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焦磷酸測序 技術原理
焦磷酸測序 技術是由4種酶催化的同一反應體系中的酶級聯化學發光反應。
焦磷酸測序技術的原理是:引物與模板DNA退火后,在DNA聚合酶(DNA polymerase)、ATP硫酸化酶(ATP sulfurytase).熒光素酶(1uciferase)和三磷酸腺苷雙磷酸酶(Apyrase)4種酶的協同作用下,將引物上每一個dNTP的聚合與一次熒光信號的釋放偶聯起來,通過檢測熒光的釋放和強度,達到實時測定DNA序列的目的。焦磷酸測序技術的反應體系由反應底物、待測單鏈、測序引物和4種酶構成。反應底物為5’-磷酰硫酸(adenosine- 5’-phosphosulfat,APS)、熒光素(1uciferin)。







